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 來源:實(shí)驗動物那些事兒 日期:2024.05.14 

小鼠麻(má)醉指導原則

目的

本文是由ARC獸醫人員設計的小鼠麻(má)醉指導原則,旨在提供一般建議。這並不意味著它包含了適用於小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉方案(àn)應根據特定情況和研究需求與所在機構的獸醫合作製定。

麻醉是使動物完全或部分失去感覺,伴隨或不伴隨意識喪失。動物可能(néng)需要麻(má)醉進行手術、可能引起疼痛的非手術操作,或需要固定的非疼痛(tòng)操作。在麻醉前、麻醉過程(chéng)中和麻醉後,必須采取措施確保動物的安全和麻醉的有效性。

麻(má)醉可通過胃腸外給藥或吸入給藥的方式進(jìn)行。藥物的選擇取決於具體操作、研究目的和其他因素,如(rú)動物的年齡(líng)。對於新生小鼠,有些特別考慮下文進行了概述。如對藥物選擇(zé)有疑問,請谘詢所在(zài)機構的獸醫。

01、麻醉的一般指導(dǎo)原則和注意事項

適應期:建議所有動物在運輸後(hòu)適應一周,以(yǐ)防止(zhǐ)應激引起的反應。動物(wù)至(zhì)少需要72小時才能恢(huī)複到基(jī)本生理狀態(tài)。

禁食:由於小鼠無法嘔吐,通常麻(má)醉前無需禁食。然而,如需(xū)禁食(例如為了保持體重),因小鼠的高代謝率,禁食時(shí)間不應(yīng)超過2-3小時(shí)。請注意,切勿限製飲(yǐn)水。

眼睛保護:在麻醉狀態下,小鼠的(de)眼睛會持續(xù)睜開,可能導致角膜幹燥(zào)和損傷(shāng)。因此,在如下條件(jiàn)下,應塗抹眼膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。

麻醉持續(xù)時間超過 5 min;

通過麵(miàn)罩進行麻醉。

監護:無論使用何種麻醉劑,均應監測(cè)麻醉狀態下的小鼠(shǔ),以確保心髒和呼吸功能不被過度抑製(zhì),以及麻醉深度適當。

在沒有專用設備的情況下,可以監測以下(xià)麻醉小鼠的參數:

麻醉深度:通過掐指(zhǐ)檢查;

呼吸(xī)頻率和模式:正(zhèng)常未受幹擾的呼吸(xī)率(lǜ)約為 180 bpm,麻醉期間可接受 50% 的(de)緩慢下降速率(lǜ);

粘膜顏色:應為粉紅色而非藍色或灰(huī)色;

體溫:可使用(yòng)直腸溫度計監測體溫,體溫應保持在 36℃ 以上;

血氧飽(bǎo)和度和(hé)心率:可用專用的齧齒類(lèi)動物脈搏式血氧儀監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對監(jiān)護或監護設備有任何問題,請與所在(zài)機(jī)構的獸醫聯係。

保溫:所有種屬在(zài)麻醉狀態下均存在低體溫的風險。小(xiǎo)鼠由於體表麵(miàn)積與體重比高,尤(yóu)其(qí)容(róng)易受到(dào)影(yǐng)響。低體溫(wēn)對(duì)動物會產生顯著的生理(lǐ)應(yīng)激,可能(néng)延長恢複(fù)時間並(bìng)有潛在致命風險。

在所有麻醉過程中(zhōng)提供額外(wài)的保溫措施。

補充熱(rè)源包(bāo)括循環水毯、電熱墊和可在微波或(huò)水浴中加熱的市(shì)售產品(如等溫墊或(huò)凝膠加熱器)。

切勿直接將動物放在熱源上。

如對使用(yòng)或購買額外的保(bǎo)溫來源有疑(yí)問,請與您所在機構的獸醫聯係。

補液:在麻醉(zuì)時間(jiān)較長或動(dòng)物(wù)患病、老年或(huò)虛弱的情況下(xià),考慮腹腔或皮下(xià)注射溫熱的液體。更多信息請谘詢您的獸(shòu)醫。

恢複:持續監測動物直至其完全恢複。

在幹淨的籠子裏,將動物放在紙巾上(不使用(yòng)墊(diàn)料)。這樣可以(yǐ)最大程度地減少氣管阻塞或肺炎的風(fēng)險。

麻醉後的動物單(dān)獨放在一個籠子裏進行恢複。

恢(huī)複期間(jiān)繼續提供(gòng)額外的保溫(wēn)。

當動物能夠走動時,將其送回原籠中子,並提供飼料和水。

根據所進行的手術,為了避免同籠夥伴啃縫(féng)線或切口處的創傷,小鼠可能需要在(zài)術後階段單獨飼養。任何單獨飼養的計劃都應包括(kuò)在IACUC方案中,以便進行審查和批(pī)準。

02、麻(má)醉藥物和(hé)程序

吸入麻醉劑: 異氟烷是首選的吸入麻醉劑(jì)。 起效快、恢複可靠。

A. 吸入麻醉可(kě)以通過滴瓶法(fǎ)、誘導室、麵(miàn)罩或氣管插管使用精密蒸汽(qì)器進行。

i.滴(dī)瓶法:

a.請勿使小(xiǎo)鼠直(zhí)接(jiē)接觸液體吸入麻醉劑(可(kě)通過在棉花或紗(shā)布上放置不可滲透的網格來實現)。

b. 由於無法控製室內的麻醉劑濃(nóng)度,並且濃度可能迅速達到有毒水平,因此該方法僅適用於(yú)非常短的手(shǒu)術,如尾部活檢、皮下腫(zhǒng)瘤植入(rù)或麵罩麻醉前的誘導。

ii.誘導室、麵罩和氣管插管:

a.這些需要配備氧氣源和精密蒸發器的氣體麻醉機。一些研究單位可能使用(yòng)室內空氣而不是純氧作為氣源,這也是可接受的。

b.蒸(zhēng)發器必須與特定的吸入麻醉劑兼容。

c.由於小鼠呼吸能力較小,使用非循環呼(hū)吸係統。

iii. 當(dāng)使用(yòng)吸入性麻醉時,使用通風櫃或配備氣體清除係(xì)統的麻醉係統,以盡量減少職業暴露於排(pái)出(chū)氣體。

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B. 注射麻醉劑:氯胺酮/賽拉嗪聯合使用是小(xiǎo)鼠的(de)首選注射麻醉劑。

下麵列出了其他常(cháng)用的注射劑。

i. 小(xiǎo)鼠(shǔ)對各(gè)種麻醉藥的敏感(gǎn)性差(chà)異(yì)顯(xiǎn)著。 年齡、體質、品係、健康狀況、基因(yīn)調控和性別等因素都可能(néng)影響麻醉敏感性。以下(xià)劑量僅為一般指導原則,基於上述因素可能存在顯著差異。在您的方案中添加麻醉劑時,建議提供一個範圍,以允許根據每隻動物的(de)特定需求進行給藥。

ii. 不建(jiàn)議在小鼠中進行肌(jī)肉注射(IM),因為可能導致組織刺激、跛行和自殘等並發症。

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*一個很好的初始(shǐ)方案是 100 mg/kg 氯胺酮(tóng)和 7 mg/kg 塞拉嗪。

**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍(bèi)於右(yòu)美托(tuō)咪定體積(jī)的阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉右(yòu)美托咪定。然而,阿替美唑的安全範圍(wéi)非常高,因此如果(guǒ)逆轉非常緊急,給(gěi)予右美托(tuō)咪定等體積(jī)的阿替美唑,可(kě)使阿替美唑的劑量增加 10 倍,這是安全的。

同樣,使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然塞拉(lā)嗪具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更純淨,且與(yǔ)α2 受體結合更緊密,因(yīn)此(cǐ)等體積逆轉塞拉嗪也可行。

C. 注射麻醉劑的一種類型是局部麻醉劑。

i. 局麻藥通過(guò)特異性結合神經細胞膜上的電壓門(mén)控 Na + 通道來(lái)阻斷神(shén)經衝動。

ii. 給(gěi)藥(yào)途徑(jìng)包括(kuò)粘膜(鼻、眼等(děng))局部給藥(yào)或直接(jiē)注射到組織和神(shén)經束周圍。

iii. 在疼痛刺激(如切口)之前給予局部麻醉劑被(bèi)認為是輔助鎮痛藥物,與阿片類和 非甾體抗炎藥(NSAID)一起使用。

iv. 由於持續時間較短(數小時),不鼓勵將局部麻醉劑作為(wéi)主要鎮痛(tòng)藥物使用,

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03、對小鼠麻醉的特殊考慮:仔鼠(shǔ)麻醉

目前文獻(xiàn)中描(miáo)述了幾種適用於(yú)新生齧齒動物的麻(má)醉方法(fǎ),包(bāo)括注射麻醉、吸入麻醉和低溫麻(má)醉。 

新生齧齒(chǐ)動(dòng)物的麻醉會導致親(qīn)代啃食後代的問題。可通過確保新(xīn)生仔(zǎi)鼠完全恢複後再歸還(hái)給母(mǔ)鼠來減少這種情況。其他措施包括讓幼仔接觸來(lái)自於母鼠籠中的汙染(rǎn)墊料,並將幼仔(zǎi)放在窩(wō)仔中間位置。

低溫麻醉

低(dī)溫麻醉(zuì)隻適用(yòng)於7日齡以下的新生齧齒動物,並且不應(yīng)用於持續(xù)時間超過30分鍾的手術。

動物不應(yīng)直接置於(yú)冰上(在動物和底層冰浴之間使用乳膠手套或其他物質)。

當足部反射(shè)消失時(shí),動物已(yǐ)達到適當的麻醉水平。

手(shǒu)術過程(chéng)中請勿使用白熾燈,因為它會使手術區域變熱,導致動物從手術麻醉(zuì)狀態中蘇醒(xǐng)。

麻醉後,動物應緩慢複溫。快(kuài)速升溫可能會導(dǎo)致組織損傷。可使用循環水毯、加熱墊 (40℃) 或培養箱 (33℃) 中給(gěi)動物重新升溫。

幼仔能夠在無直接物理刺激的情況下移動後,可將其歸還給母鼠(shǔ)。

吸入麻醉

新生齧齒動物可能(néng)比成年齧齒動物需要更長的(de)吸入麻醉誘導時間。

在麻醉盒中進行誘導通常需 5% 異氟烷,維(wéi)持(麻(má)醉誘導盒或鼻(bí)錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注(zhù)射麻醉

氯胺酮/塞拉(lā)嗪是 7 日齡以上小鼠的(de)推(tuī)薦注射麻醉劑:通過 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最大體積 = 0.5 mL)。

對於7日齡以上的(de)小鼠,推薦使用氯胺酮/塞拉嗪作為注射麻醉劑:使用27g針(zhēn)頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(qín)(最(zuì)大體(tǐ)積=0.5 ml)。

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